Nacido en Pavía, Ambrogio Maestri estudió Piano y Canto con Umberto Grilli. Su carrera internacional comenzó en 2001 cuando debutó como Falstaff en La Scala de Milán y en el Teatro Verdi de Busseto bajo la dirección de Riccardo Muti y Giorgio Strehler.
En el Teatro alla Scala, sus compromisos incluyen los papeles principales de Don Pasquale y Gianni Schicchi, Jago en Otello, Dulcamara en L’elisir d’amore, Renato en Un ballo in maschera, Don Carlo di Vargas en La forza del destino y Giorgio Germont en La traviata. También ha actuado en el Metropolitan Opera, la Ópera de París, la Ópera Estatal de Viena, la Ópera Estatal de Baviera y la Deutsche Oper de Berlín. Su repertorio incluye el Conde de Luna en Il trovatore, Amonasro en Aida, los papeles principales de Simon Boccanegra, Rigoletto, Nabucco, Don Pasquale, Tonio y Alfio en Cavalleria Rusticana y Pagliacci, Gérard en Andrea Chénier, Dulcamara en L’elisir d’amore y Mamma Agata en Viva la Mamma.
Entre sus compromisos recientes figuran Il trittico en la Ópera Estatal de Viena, L’elisir d’amore en la Ópera Estatal de Baviera y en la Ópera Estatal de Viena, Il barbiere di Siviglia en el Teatro Verdi de Salerno y Madama Butterfly en el Teatro Lírico Giuseppe Verdi de Trieste.
Debutó en el Gran Teatre del Liceu con Aida en la temporada 2007/08, y ha regresado con Falstaff (2010/11), L’elisir d’amore (2012/13), Tosca (2013/14), Nabucco (2015/16), Il tabarro y Gianni Schicchi (2022/23), Adriana Lecouvreur (2023/24) y L’elisir d’amore (2025/26).