Nacido en Pavia, Ambrogio Maestri estudió Piano y Canto con Umberto Grilli. Su carrera internacional comenzó en 2001 cuando debutó como Falstaff en La Scala de Milán y en el Teatro Verdi de Busseto bajo la dirección de Riccardo Muti y dirigido por Giorgio Strehler.
En el Teatro alla Scala, sus compromisos incluyen los roles principales en Don Pasquale y Gianni Schicchi, Jago en Otello, Dulcamara en L'elisir d'amore, Renato en Un ballo in maschera, Don Carlo di Vargas en La forza del destino y Giorgio Germont en La traviata. También ha actuado en el Metropolitan Opera, la Ópera de París, la Ópera Estatal de Viena, la Ópera Estatal de Baviera y la Deutsche Oper de Berlín. Sus roles incluyen el Conde de Luna en Il trovatore, Amonasro en Aida, los roles principales en Simon Boccanegra, Rigoletto, Nabucco, Don Pasquale, Tonio y Alfio en Cavalleria Rusticana y Pagliacci, Gérard en Andrea Chénier, Dulcamara en L'elisir d'amore y Mamma Agata en Viva La Mamma.
Los compromisos de Ambrogio para la temporada 2023/24 incluyen Don Pasquale e Il trittico en la Ópera Estatal de Viena, Tosca en Tokio y Nagoya, Adriana Lecouvreur en la Ópera de París y el Gran Teatre del Liceu, L’elisir d’amore en la Ópera Estatal de Baviera y nuevamente Don Pasquale en Milán. Debutó en el Gran Teatre del Liceu con Aida la temporada 2007/08, y volvió con Falstaff (2010/11), L’elisir d’amore (2012/13), Tosca (2013/14), Nabucco (2015/16) e Il tabarro y Gianni Schicchi (2022/23).